Hatua za Uchambuzi wa Kutenganisha Chromatografia ya Gesi

Faida ya chromatografia ya gesi ni kwamba inaweza kutenganisha na kuchambua mchanganyiko wa vijenzi vingi. Hata hivyo, kwa sababu kuna vitu vingi vinavyoweza kutumika kwa uchambuzi wa chromatographic, nyakati za kuonekana kwa kilele cha chromatographic ya vipengele tofauti kwenye awamu moja ya stationary inaweza kuwa sawa, hivyo ni vigumu kutaja vitu visivyojulikana kulingana na kilele cha chromatographic peke yake. Kwa sampuli isiyojulikana, lazima kwanza tuelewe chanzo chake, asili, na madhumuni ya uchanganuzi; kwa msingi huu, tunaweza kufanya makadirio ya awali ya sampuli; na kisha utumie mbinu fulani kufanya utambuzi wa ubora kulingana na dutu safi inayojulikana au data husika ya marejeleo ya ubora wa kromatografia. Tafadhali tazama yafuatayo:

1. Chanzo na mbinu ya matibabu ya sampuli

Sampuli ambazo zinaweza kuchambuliwa moja kwa moja na GC kawaida ni gesi au vimiminiko. Sampuli thabiti zinapaswa kuyeyushwa katika kiyeyusho kinachofaa kabla ya uchanganuzi, na uhakikishe kuwa sampuli hazina vijenzi (kama vile chumvi isokaboni) ambavyo haviwezi kuchanganuliwa na GC, ambavyo vinaweza kuharibu vijenzi vya safu wima ya kromatografia. Kwa njia hii, tunapopokea sampuli isiyojulikana, ni lazima tuelewe chanzo, ili kukadiria vipengele ambavyo sampuli inaweza kuwa nayo na kiwango cha kuchemka cha sampuli. Ikiwa mfumo wa sampuli ni rahisi na vipengele vya sampuli vinaweza kuyeyushwa, vinaweza kuchambuliwa moja kwa moja. Iwapo kuna vipengele katika sampuli ambavyo haviwezi kuchanganuliwa moja kwa moja na GC, au mkusanyiko wa sampuli ni mdogo sana, ni lazima utibabu unaohitajika ufanyike, kama vile utangazaji, uchanganuzi, uchimbaji, ukolezi, upunguzaji, utakaso, utokaji na mbinu zingine za kuchakata sampuli.

2. Tambua usanidi wa chombo

Kinachojulikana kuwa usanidi wa chombo hurejelea kifaa gani cha sindano cha sampuli, ni mtoa huduma gani wa gesi, safu wima gani ya kromatografia na kitambua kipi kinatumika kuchanganua sampuli.

Kwa ujumla, aina ya detector inapaswa kuamua kwanza. Vigunduzi vya FID mara nyingi huchaguliwa kwa hidrokaboni, na vigunduzi vya ECD ni rahisi kuchagua kwa vitu vilivyo na vikundi vingi vya elektroni (F, Cl, n.k.) na maudhui kidogo ya hidrokaboni; wakati mahitaji ya unyeti wa kugundua sio juu au vipengele visivyo vya hidrokaboni vinajumuishwa, detectors za TCD zinaweza kuchaguliwa; kwa sampuli zenye salfa na fosforasi, vigunduzi vya FPD vinaweza kuchaguliwa.

Kwa sampuli za kioevu, unaweza kuchagua njia ya sindano ya pedi ya diaphragm, na sampuli za gesi zinaweza kutumia valve ya njia sita au njia ya sindano ya adsorption ya desorption ya joto. Kromatografia ya jumla husanidi mbinu ya sindano ya pedi ya kiwambo pekee, kwa hivyo sampuli za gesi zinaweza kuchanganuliwa kwa kutumia uchanganuzi wa kutengenezea adsorption-mbinu ya sindano ya pedi ya diaphragm.

Chagua safu wima zinazofaa za kromatografia kulingana na sifa za vipengele vya kujaribiwa, na kwa ujumla ufuate kanuni ya kufanana na utangamano. Chagua safu zisizo za polar wakati wa kutenganisha vitu visivyo na polar, na uchague safu ya polar wakati wa kutenganisha vitu vya polar. Baada ya safu ya kromatografia kuamua, halijoto ya kufanya kazi ya safu ya kromatografia imedhamiriwa kulingana na tofauti katika mgawo wa usambazaji wa vipengee vya kujaribiwa kwenye sampuli. Njia ya isothermal inapitishwa kwa mifumo rahisi, na njia ya joto iliyopangwa inapitishwa kwa uchambuzi kwa mifumo ngumu yenye tofauti kubwa katika mgawo wa usambazaji.

Gesi za kubeba zinazotumika sana ni hidrojeni, nitrojeni, heliamu, n.k. Hidrojeni na heliamu zina uzito mdogo wa molekuli na mara nyingi hutumika kama gesi za kubeba kwa kromatografia ya safu wima iliyopakiwa; nitrojeni ina uzito mkubwa wa molekuli na mara nyingi hutumiwa kama carrier wa gesi kwa kromatografia ya gesi ya capillari; heliamu hutumika kama mbeba gesi kwa spectrometry ya molekuli ya kromatografia ya gesi.

3. Kuamua hali ya awali ya uendeshaji

Wakati sampuli iko tayari na usanidi wa chombo umedhamiriwa, utenganisho wa majaribio unaweza kuanza. Kwa wakati huu, hali ya awali ya kujitenga lazima iamuliwe, ambayo ni pamoja na kiasi cha sindano, joto la bandari ya sindano, joto la detector, joto la safu na kiwango cha mtiririko wa gesi ya carrier. Kiasi cha sindano imedhamiriwa kulingana na mkusanyiko wa sampuli, uwezo wa safu na unyeti wa detector. Wakati mkusanyiko wa sampuli hauzidi 10mg/mL, ujazo wa sindano ya safu iliyopakiwa kawaida ni 1- 5uL, wakati kwa safu ya kapilari, ikiwa uwiano wa mgawanyiko ni 50: 1, kiasi cha sindano kwa ujumla hauzidi 2uL. Joto la bandari ya sindano imedhamiriwa hasa na kiwango cha kuchemsha cha sampuli, na joto la uendeshaji la safu ya chromatographic lazima pia izingatiwe. Kimsingi, ni faida kuwa na halijoto ya juu kwenye mlango wa sindano, kwa ujumla karibu na sehemu ya kuchemka ya kijenzi chenye kiwango cha juu zaidi cha kuchemka kwenye sampuli, lakini chini ya kiwango cha joto kinachotengana kwa urahisi.

4. Uboreshaji wa masharti ya kujitenga

Madhumuni ya uboreshaji wa hali za utengano ni kufikia matokeo ya utengano yanayohitajika katika muda mfupi zaidi wa uchanganuzi. Wakati madhumuni ya kutenganisha msingi hayawezi kufikiwa kwa kubadilisha joto la safu na kiwango cha mtiririko wa gesi ya mtoa huduma, safu ndefu ya kromatografia inapaswa kubadilishwa, au hata safu ya kromatografia yenye awamu tofauti ya kusimama, kwa sababu katika GC, safu wima ya kromatografia ndio ufunguo wa mafanikio ya utengano.

5. Utambulisho wa ubora

Kinachojulikana kitambulisho cha ubora ni kuamua sifa ya kilele cha kromatografia. Kwa sampuli rahisi, zinaweza kujulikana na vifaa vya kumbukumbu. Hiyo ni, chini ya hali sawa za kromatografia, weka sampuli ya kawaida na sampuli halisi kando, na ubaini ni kilele gani kwenye kromatogramu ndicho kipengee cha kuchanganuliwa kulingana na thamani ya kubaki. Ni lazima ieleweke kwamba misombo tofauti inaweza kuwa na thamani sawa ya uhifadhi kwenye safu wima moja, kwa hivyo haitoshi kutumia data moja tu ya uhifadhi kwa uamuzi wa ubora wa sampuli zisizojulikana. Mbinu ya ubora ya uhifadhi wa safu wima mbili au safu wima nyingi inaaminika zaidi katika GC, kwa sababu uwezekano wa misombo tofauti kuwa na thamani sawa ya ubakishaji kwenye safu wima tofauti ni mdogo zaidi. Gesi kromatografia-mass spectrometry inaweza kutumika wakati hali kuruhusu.

6. Uchambuzi wa kiasi

Inahitajika kuamua ni njia gani ya kutumia ili kuamua yaliyomo kwenye sehemu ya kujaribiwa. Mbinu za upimaji wa kromatografia zinazotumika kawaida si chochote zaidi ya njia ya asilimia ya eneo la kilele (urefu wa kilele), njia ya kuhalalisha, njia ya kawaida ya ndani, njia ya kawaida ya nje na njia ya kuongeza kiwango (pia inaitwa njia ya juu). Njia ya asilimia ya eneo la kilele (urefu wa kilele) ndiyo rahisi zaidi lakini sahihi zaidi. Mbinu hiyo ni ya hiari ikiwa tu sampuli ina homologues au ni ya ukadiriaji mbaya pekee. Kwa kulinganisha, mbinu ya kiwango cha ndani ina usahihi wa juu zaidi wa kiasi kwa sababu inakadiria kwa kutumia thamani ya majibu inayohusiana na kiwango (kinachoitwa kiwango cha ndani), ambacho huongezwa kwa sampuli ya kawaida na sampuli isiyojulikana kwa mtiririko huo, ili makosa kutokana na mabadiliko ya hali ya uendeshaji (ikiwa ni pamoja na kiasi cha sindano) inaweza kukabiliana. Kuhusu njia ya kawaida ya kuongeza, kiwango cha dutu inayojaribiwa huongezwa kwa kiasi kwa sampuli isiyojulikana, na kisha hesabu ya kiasi inafanywa kulingana na ongezeko la eneo la kilele (au urefu wa kilele). Mchakato wa utayarishaji wa sampuli ni sawa na njia ya kawaida ya ndani, lakini kanuni ya hesabu inatokana kabisa na njia ya kawaida ya nje. Usahihi wa wingi wa kisheria wa nyongeza unapaswa kuwa kati ya mbinu ya kawaida ya ndani na mbinu ya kawaida ya nje.

7. Uthibitishaji wa njia

Kinachojulikana kama uthibitishaji wa njia ni kuthibitisha ufanisi na uaminifu wa njia iliyotengenezwa. Utendaji kwa ujumla hurejelea iwapo usanidi wote wa zana unaotumika unaweza kununuliwa kama bidhaa, iwe mbinu ya uchakataji wa sampuli ni rahisi na rahisi kufanya kazi, iwe muda wa uchanganuzi ni wa kuridhisha, na kama gharama ya uchanganuzi inakubalika kwa wenzao. Kuegemea ni pamoja na safu ya kipimo, kikomo cha ugunduzi, urejeshaji wa njia, kurudia, uundaji tena na usahihi.